目的:观察间日疟现症患者外周树突状细胞(dendritic cells,DC)亚群比例的的变化,探讨DC亚群在间日疟发病机制中的作用。方法:采用流式细胞术四色荧光分析法检测18例间日疟现症患者(疟疾组)和36名健康成人(对照组)外周血的浆细胞样DC(PDC)和髓样DC(mDC)的比例。结果:疟疾组患者PDC明显低于对照组(P0.01),mDC/PDC明显高于对照组(P0.01),而mDC在2组间无明显不同(P0.05)。结论:间日疟现症患者机体呈现免疫抑制状态,间日疟原虫与DC相互作用,可能通过调整mDC/PDC的比值参与间日疟感染的Th1型免疫应答的诱导和调控。

目的:检测初治和复治结核病患者外周血NK细胞数量和胞内杀伤分子的变化。方法:取健康人(112名)和结核病患者145例(初治105例,复治40例)抗凝外周全血标本,加荧光标记抗CD3、CD56、CD8、颗粒酶和穿孔素抗体进行标记,进行流式细胞术检测。结果:初治肺结核患者外周血NK细胞的比例(16.958.27)%显著低于健康组(19.999.28)%(P0.01)。健康组外周血NK细胞绝对值计数为(44.3226.69)10P4P/ml,结核初治组为(33.3121.44)10P4P/ml,复治组为(36.824.97)10P4P/ml,结核初治组明显低于健康组(P0.01)。结核病患者NK细胞中表达颗粒溶解素(85.7811.63)%,穿孔素(82.8817.05)%,颗粒酶(79.0715.64)%,健康组(87.3110.34)%、(82.8513.03)%、(88.047.27)%,2组颗粒溶解素和穿孔素差异均无统计学意义(P0.05),而颗粒酶差异有统计学意义(P0.01)。结论:初治组结核病患者外周血NK细胞数量明显降低,但NK细胞中颗粒溶解素、穿孔素的表达和健康组差异均无统计学意义。

目的:比较结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)和磷酸类抗原(HDMAPP)刺激正常人外周血T细胞活化和增殖的特点。方法:健康成人外周血单个核细胞(PBMC,110P6P/ml),分别加Mtb-HAg(5g/ml)和HDMAPP(210P-9Pmol/ml)进行刺激,同时给予IL-2(50u/ml)维持细胞增殖,另外设立只加IL-2的对照组。培养10d后,采用抗CD3-FITC和抗TCR-PE荧光抗体标记细胞,流式细胞术检测T细胞的比例。结果:正常人PBMC经Mtb-HAg刺激扩增后T细胞在扩增细胞中的比例明显低于HDMAPP组(P0.01),均明显高于IL-2对照组(P0.01)。各个体对2种抗原刺激扩增T细胞呈线性正相关关系(RP2P=0.8551,P0.01)。结论:Mtb-HAg和HDMAPP均可优势激活人T细胞,且后者较前者有更强的活性。

目的:观察健康成人外周血中T细胞和T细胞中辅助性T细胞17(TH17)样细胞和TH22样细胞的比例。方法:采集18名正常人外周血用荧光抗体染色后用流式细胞仪检测T细胞、T细胞中白细胞介素-22(IL-22)、IL-17和干扰素(IFN-)表达细胞的百分比。结果:将正常人外周新鲜全血中CD3+T细胞分成T细胞和T细胞两群。TH1样细胞在T细胞中比例为14.31%,明显低于在T细胞中的61.07%(P0.01),而TH17样细胞在T细胞中的比例为1.16%,明显高于在T细胞中的0.27%(P0.01),TH22样细胞在T细胞中与T细胞中的比例分别为1.06%和0.91%,差异无统计学意义(P0.05)。结论:在T细胞中存在IL-17和IL-22均阳性的T17细胞和仅产生IL-22的T22细胞,但比T细胞中的TH17样细胞和TH22样细胞少。

目的：比较磷酸化抗原(HDMAPP)、结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)和结核杆菌低分子耐热抗原Mtb-HAg(10k)刺激外周血T细胞产生-干扰素(IFN-) 的反应能力方面的特点及差异。方法：采集正常人外周血，分别用HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg(10k)刺激培养14h,再加入莫能霉素继续培养6 h，收集细胞，加入荧光标记单抗进行表面分子和胞内染色，然后在流式细胞仪上检测各实验组中CD3+细胞和CD3+细胞胞内IFN-的表达。结果：正常人各抗原实验组CD3+细胞和CD3+ 细胞胞内产生IFN-+细胞比率较阴性组对照组升高(P0.01)。各抗原刺激组CD3+ 细胞产生IFN-+细胞比率明显高于CD3+细胞(P0.05~P0.01)。3种抗原刺激组间CD3+细胞和CD3+细胞无明显不同(P0.05)。结论：HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg(10k)均可以刺激外周血中T细胞中和 细胞群产生IFN-，均可特异性诱导刺激CD3+细胞产生IFN-，HDMAPP、Mtb-HAg(10k)对CD3+细胞产生IFN-的表达量高于Mtb-HAg。

目的：探讨幽门螺杆菌(Hp)对胃黏膜上皮细胞(GES-1)自噬和凋亡的影响。方法：Hp与GES-1体外共培养，同时设立雷帕霉素(RAPA)、3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预组及空白对照组,于2、4、6、12及24 h终止感染，通过免疫蛋白印迹、荧光染色、透射电镜、流式细胞术及细胞内活菌计数等方法观察Hp对GES-1自噬和凋亡的影响。结果：Hp+GES-1组在2 h出现自噬标志蛋白LC3-Ⅱ表达及细胞内荧光自噬颗粒，透射电镜观察到细胞内出现双层或多层膜包裹的自噬小体样结构，细胞自噬在4 h达高峰，感染中后期逐渐减弱并消失；RAPA+Hp+GES-1组细胞自噬程度进一步增强，细胞凋亡率及细胞内活菌数均降低(PPP结论：Hp可在感染早期诱导GES-1自噬;RAPA和3-MA可增强或降低自噬发生程度，从而减轻或促进细胞损伤。

目的：探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，Mtb)感染THP-1细胞后对细胞表面白细胞分化抗原14(CD14)表达的影响。方法：Mtb以10∶1感染佛波醇酯(PMA)分化的THP-1细胞，建立Mtb感染THP-1细胞的模型。采用流式细胞术检测THP-1细胞、PMA分化的THP-1细胞及Mtb感染THP-1细胞CD14的表达。结果：THP-1细胞和PMA分化的THP-1细胞表面表达CD14的阳性率分别为5.5%和21.6%，对Mtb的吞噬率分别为7.7%和93.0%；Mtb感染的THP-1细胞表面表达CD14的阳性率为27.5%。结论：PMA分化后的THP-1细胞表面CD14的表达增加，Mtb感染后CD14的表达进一步增加，对Mtb的吞噬率增加。